Page 27 - Alimentaria Integral Enero 2024
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modificaciones al final del proceso, ajustando el pH final de la
muestra a 3.3 con 10 M de KOH. La extracción de las vitaminas
B9 y B12 de Fruper siguió el método propuesto por Aslam et al.
[2], con cambios en la temperatura de extracción,
reduciéndola a 60 °C durante 40 minutos [12]. Finalmente, la
extracción de la vitamina C de Fruper se realizó según el
método propuesto por Klimczak y Gliszczyńska-Świgło [13],
modificando el proceso de centrifugación aumentando las
revoluciones a 8500 rpm durante 20 minutos para garantizar
una mejor clarificación de la muestra [10-14].
2.4. CUANTIFICACIÓN
La cuantificación de las vitaminas se realizó utilizando la
técnica de cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) con
un equipo PERKIN ELMER® acoplado con detectores de matriz
de diodos (DAD) y dispersión de luz (LDD). Se aplicaron
condiciones cromatográficas como sigue: temperatura del
horno = 30 °C; flujo = 1.0 mL/min; volumen de inyección = 100
μL; detección = 210 nm (B6), 283 nm (B6, B9, B12, C), 361 nm (B12),
325 (A) y 265 (D3). Todas las mediciones se realizaron por
triplicado. Se aplicaron dos sistemas cromatográficos
diferentes: uno para la vitamina liposoluble A y otro para las
vitaminas hidrosolubles (B1, B2, B3, B6, B9, B12 y C). El primero
utilizó un método isocrático (99% metanol: agua HPLC),
mientras que el segundo incluyó una rampa de acetonitrilo:
buffer fosfato 25 mM, pH 3.32.
2.5. ANÁLISIS ESTADÍSTICO
El análisis de varianza (ANOVA) se realizó utilizando Excel
(Microsoft). Se utilizó la prueba de rango múltiple de Tukey
(HSD) para comparar las medias del contenido de vitaminas
entre los tratamientos térmicos para cada uno de los
productos mencionados anteriormente. La diferencia
significativa se definió como p <0.05.
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