Page 27 - Lactopress Julio 2024
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Para establecer los parámetros de crecimiento, las células
activadas se inocularon (5%) en 8 tubos, cada uno
conteniendo 7 mL del cultivo líquido correspondiente.
Inmediatamente después de la inoculación, se tomó uno de
los tubos y se apartó para las determinaciones analíticas, los
otros tubos se colocaron en incubación a las temperaturas
establecidas en la Tabla 1. Para realizar la curva de crecimiento
durante 24 horas. Durante la incubación, se tomó un tubo cada
2 horas, en total se tomaron 8 tubos en diferentes momentos
(t0 = inicio, t1 = 2h, t2 = 4h, t3 = 6h, t4 = 8h, t5 = 10h, t6 = 12h y t7 =
24h). Las determinaciones analíticas se realizaron en las
muestras tomadas. Cada muestra se realizó por triplicado.
2.4. Determinaciones analíticas
2.4.1. Determinación de la concentración de biomasa (g/L)
La cuantificación del crecimiento microbiano se realizó
mediante tres métodos que se correlacionaron a través de
una ecuación lineal y un análisis estadístico. (1) El crecimiento
celular se midió espectrofotométricamente en función de la
densidad óptica a 600 en un espectrofotómetro Spectronic®
3w2R179001 genesys 2PC. (2) Las UFC/ml se realizaron
utilizando la técnica de microgotas, sembradas en la
superficie de una placa de agar con 10 μL en duplicado de las
últimas 4 diluciones seriadas. Los cultivos se incubaron
durante 48 horas a las condiciones de temperatura
establecidas (Tabla 1), después de la incubación, se realizó el
recuento de colonias. Para precisar los resultados, se
consideró el número promedio de colonias crecidas en la
dilución por cada 100 (factor de corrección ajustado a 1 ml) y se
multiplicó por el inverso de la dilución. (3) El peso seco se midió
en 5 mL de cultivo líquido recolectado por filtración mediante
membrana (filtros 0,2 μm x 47 mm ADVANTE Brand)
previamente pesados en la balanza analítica Adventurer
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